联邦汽车运输安全管理局是负责制定规则的运输部门，该规则不仅规定了谁接受测试，而且规定了什么和在哪种情况下。 DOT药物测试规则仅适用于商业许可的驾驶员。它们不适用于员工，例如那些协助装卸货物的员工，即使这些人看起来像是执行安全敏感功能。
情境要求
DOT法规规定了六种强制性测试情况。这些是就业前，事故后，随机，合理的怀疑，返回工作和后续测试。如果驾驶员在拒绝或未通过药物或酒精测试后重返工作岗位，驾驶员必须首先使用合格的药物滥用专业人员完成DOT指定的返回工作流程。虽然在大多数情况下单次测试就足够了，但在12个月内至少需要进行6次测试才能进行随访。
药物检测要求
药物检查适用于大麻，可卡因和阿片类药物，如吗啡和可待因。还包括安非他明和甲基苯丙胺刺激剂和苯环利定，通常称为PCP。截止浓度从每毫升血液15纳克开始。 DOT计划仅涵盖这些类别的药物。雇主可以实施单独的公司药物筛选政策，以测试其他药物。
酒精测试要求
虽然针对非商业驾驶员的州法律规定，每1000克血液中含有0.08克酒精作为法定限量，但DOT测试的最大血液酒精浓度为0.02％。尿液采样是最常见的检测方法。事故后和合理的怀疑测试通常使用DOT批准的血液或呼气测醉器测试进行。 DOT还将接受警方管理的呼气测试结果。
隐私考虑因素
强制性法规并不总是允许在药物测试的抽样阶段期望隐私。例如，返回值班和后续测试是直接观察测试，其中观察者必须在驾驶员提供尿液样本时观察。但是，在处理和测试样品时，必须遵守旨在保护驾驶员身份的严格保密和安全要求。
